——摘自《科學(xué)養(yǎng)魚》 繼抗生素時代后,微生態(tài)制劑作為可替代抗生素的一種綠色飼料添加劑引起人們廣泛的關(guān)注。其中,植物乳桿菌以其免疫能力強、抗病效果好和對水產(chǎn)動物的益生作用受到廣大研究者的重視。
一、植物乳桿菌的特性 植物乳桿菌(Lactobacillus plantarum)屬于乳桿菌科中的乳桿菌屬,是一類革蘭氏陽性、不產(chǎn)芽孢、厭氧生長的細(xì)菌,最適生長溫度為30~35℃,厭氧或兼性厭氧,菌種為直或彎的桿狀,最適pH6.5 左右,是魚腸道中的正常菌群,能在魚腸道中定植,代謝產(chǎn)物主要是乳酸,其次是一些揮發(fā)性脂肪酸,可以降低腸道pH 值從而抑制其他致病菌的生長、繁殖。
二、作用機制 1.植物乳桿菌是以糖為原料發(fā)酵產(chǎn)生乳酸的革蘭氏陽性菌,能分解食物中的蛋白質(zhì)、糖類、脂肪等,提高食物的消化率和生物價,并產(chǎn)生大量有機酸使腸道pH 值降低,抑制病原菌的克隆和定植,維持腸道微生態(tài)平衡。 2.植物乳桿菌活菌體和其代謝產(chǎn)物中含有較高的超氧化物歧化酶(SOD),能消除氧自由基的不利作用,增強體液免疫和細(xì)胞免疫,增強機體調(diào)節(jié)活性,促進(jìn)生長。 3.其代謝產(chǎn)物中有抗膽固醇因子,可降低血清中膽固醇含量。 4.植物乳桿菌細(xì)胞壁能與變異原性物質(zhì)和致癌物穩(wěn)定結(jié)合,具有抗變異原性。
1.在魚類養(yǎng)殖中的應(yīng)用 齊欣等(2007)在彭澤鯽飼料中添加植物乳桿菌,研究表明,植物乳桿菌可提高彭澤鯽的增重率和存活率,降低了餌料系數(shù),并且在降低水體氨氮、亞硝酸鹽及COD 含量方面均有一定效果,但差異不顯著。Gatescoup 等(1997)將植物乳桿菌添加到輪蟲的培養(yǎng)基中,并用該輪蟲作為大菱鲆幼魚餌料,結(jié)果表明,植物乳桿菌能抑制殺鮭氣單胞菌,提高輪蟲成活率,從而有效降低大菱鲆幼魚受到弧菌感染的死亡率。Suzer 等(1999)發(fā)現(xiàn)當(dāng)使用含有4 種乳桿菌的商業(yè)益生菌和飼料混合在一起投喂時,對幼魚影響較大,無論是各種消化酶的酶活性還是魚的存活率、生長速度都有顯著的升高。但直接將植物乳桿菌劑投喂到水中則沒有效果。剛出生的小魚腸道菌群較少,投喂植物乳桿菌可改變腸道內(nèi)優(yōu)勢菌群,形成良好的腸內(nèi)環(huán)境。
2.在蝦類養(yǎng)殖中的應(yīng)用 Tung 等(2009)研究熱滅活植物乳桿菌對日本囊對蝦的益生保護(hù)作用。經(jīng)過60 天的養(yǎng)殖實驗后發(fā)現(xiàn),飼喂0.1 克/千克和1 克/千克植物乳桿菌組生長速度顯著快于對照組,其中1克/千克組飼料效率顯著高于對照組。但各處理組間存活率、攝食率、氮磷排泄、養(yǎng)殖水體和糞便中的細(xì)菌總數(shù)沒有顯著差異。實驗結(jié)束后進(jìn)行低鹽度脅迫,結(jié)果顯示0.1 克/千克和1 克/千克植物乳桿菌組累積死亡率顯著低于對照組,總紅細(xì)胞計數(shù)和吞噬細(xì)胞計數(shù)等指標(biāo)也顯著高于對照組。實驗表明熱滅活植物乳桿菌增強了日本囊對蝦的非特異性免疫能力,提高對環(huán)境脅迫的抵抗力和免疫反應(yīng)。說明植物乳桿菌相比抗生素應(yīng)用于水產(chǎn)養(yǎng)殖具有環(huán)境友好型特點。Tung等(2010)在室內(nèi)用微顆粒飼料研究了熱滅活植物乳桿菌對日本囊對蝦蚤狀幼體和無節(jié)幼體生長的影響,結(jié)果發(fā)現(xiàn),飼喂0.1 克/千克和1 克/千克植物乳桿菌,實驗組蚤狀幼體的存活率顯著高于對照組和0.001克/千克與0.01 克/千克植物乳桿菌組,而無節(jié)幼體在攝食1 克/千克植物乳桿菌組的生長指標(biāo)和抗脅迫能力顯著高于其他實驗組。
張玲(2007)將植物乳桿菌作為免疫增強劑添加到日本囊對蝦飼料中,研究對其免疫反應(yīng)的影響,結(jié)果表明,植物乳桿菌能顯著提高日本囊對蝦血漿酚氧化酶活性、血細(xì)胞數(shù)量、超氧化物歧化酶活性,并對對蝦健康無不利影響。張玲(2007)比較分析了植物乳桿菌活菌與滅活菌對日本囊對蝦免疫力和抗病力的影響,研究證實活菌與滅活的植物乳桿菌均能激活日本囊對蝦的免疫防御體系,但激活免疫反應(yīng)特征各不相同。
張玲(2007)研究植物乳桿菌對中國明對蝦生長影響時發(fā)現(xiàn),添加植物乳桿菌顯著提高了中國明對蝦幼體的存活率,顯著降低了養(yǎng)殖水體氨氮含量,并顯著提高了中國明對蝦全蝦勻漿上清液酚氧化酶活性、超氧化物歧化酶活性和蛋白濃度(P<0.05)。 何志剛等(2013)在南美白對蝦飼料中添加植物乳桿菌,養(yǎng)殖實驗表明,植物乳桿菌提高了南美白對蝦存活率,降低飼料系數(shù),提高增重率,提高對蝦收獲規(guī)格,增加養(yǎng)殖戶純利潤。
四、作用方式 1.飼料添加劑 2003 年農(nóng)業(yè)部第318 號公告《飼料添加劑品種目錄》中,公布了15 種可以直接在動物飼料中添加的微生物種類,其中就有植物乳桿菌,可以在飼料添加劑中使用。由于植物乳桿菌在生長過程中不形成芽孢,抗逆性差,易失活而難以保藏,所以,其在飼料中的添加使用受到一定限制。但隨著研究的深入和開發(fā),目前市場銷售的植物乳桿菌產(chǎn)品采用微膠囊技術(shù)包被,提高其對環(huán)境的適用性和抗逆性,可以耐受飼料制作過程中的高溫高壓,保持良好的穩(wěn)定性和生物活性。何志剛等(2013)報道,在飼料廠生產(chǎn)商業(yè)對蝦料過程中添加熱致死(Heat-killed)植物乳桿菌,進(jìn)行大塘驗證養(yǎng)殖試驗,能夠有效提高南美白對蝦的存活率和增重率。
2.使用注意事項 ①飼料配方營養(yǎng)水平過高時,高能量營養(yǎng)成分可能會掩蓋菌種作用效果。一般情況下,低營養(yǎng)水平配方更能發(fā)揮微生態(tài)制劑的作用效果。②微生態(tài)制劑在動物越小時使用效果越好,在生產(chǎn)實踐中,應(yīng)根據(jù)養(yǎng)殖動物不同的生理階段進(jìn)行相關(guān)劑量的調(diào)整。另外,不同種類的水產(chǎn)動物對益生菌的要求也不一樣。但相關(guān)報道較少,還需進(jìn)一步研究。③關(guān)注益生乳桿菌的安全性問題,乳桿菌活菌制劑在加工、運輸過程中的失活問題。④植物乳桿菌對腸道環(huán)境的耐受問題,以確保有足夠數(shù)量的活菌到達(dá)腸道而發(fā)揮作用;確定載體對益生乳桿菌的影響。
植物乳桿菌在提高水產(chǎn)動物抗病能力、提高飼料轉(zhuǎn)化率、改善生態(tài)環(huán)境等方面發(fā)揮著明顯的作用,且無污染、無殘留、安全,有利于綠色無公害水產(chǎn)品的生產(chǎn)及生態(tài)環(huán)境的凈化,發(fā)展前景十分廣闊。但在如何充分發(fā)揮植物乳桿菌的功效等方面仍應(yīng)注意從菌體保種及貯藏、飼料制作和養(yǎng)殖動物等方面綜合考慮,使植物乳桿菌的益生效果發(fā)揮最大。
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