海鱸魚苗“黑身”，檢出病毒性神經(jīng)壞死病毒一例

美人魚

[病例400]
       廣東省珠海市斗門區(qū)白蕉鎮(zhèn)一海鱸養(yǎng)殖池塘，面積6畝，水深1.5 m，配備增氧機(jī)2臺（1.5 kW/臺）（圖1）。2017年2月16日投放海鱸魚苗2萬尾/畝，投喂浮水顆粒料，每天2次，目前規(guī)格達(dá)到4～6 cm/尾。
       2月17日至2月22日，天氣連續(xù)晴天，水溫逐步升高。放苗第二天（2月17日），發(fā)現(xiàn)有海鱸魚苗“黑身”、游水、打轉(zhuǎn)，死亡量為100尾/天。
       2月22日，魚苗死亡數(shù)量達(dá)到300尾/天。
       2月23日到現(xiàn)場采樣，海鱸魚苗死亡量為300尾/天，測定水溫23℃，pH值8.0，亞硝酸鹽濃度為0.01mg/L，溶解氧為9.33mg/L，與前幾天相比基本保持不變。撈起的魚苗可見“黑身”（圖2），個(gè)別魚在水中有游水打轉(zhuǎn)的現(xiàn)象。解剖未發(fā)現(xiàn)臟器有明顯病變。用接種環(huán)在無菌條件下，分別取病魚的肝臟和腎臟接種腦心浸液培養(yǎng)基進(jìn)行細(xì)菌分離，在實(shí)驗(yàn)室28℃條件下培養(yǎng)，次日，培養(yǎng)皿中出現(xiàn)少量幾個(gè)菌落（圖3）。同時(shí)取病魚全部組織臟器，置于加有雙抗的病毒維持液中，于冰盒中保溫帶回實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行病毒檢測和陽性病料保存，經(jīng)RT-PCR鑒定，核酸電泳結(jié)果顯示于400～500 bp的位置有特異性條帶出現(xiàn)（圖4），說明病魚腦組織神經(jīng)壞死病毒（nervous necrosis virus，NNV）呈陽性。另外將3尾發(fā)病魚苗整條置于波恩氏液中固定，并進(jìn)行組織病理切片觀察。組織病理切片結(jié)果發(fā)現(xiàn)病魚腦、眼組織可見空泡化，腦組織多處壞死（圖5、圖6）。
       分析：1、病毒性神經(jīng)壞死病又稱病毒性腦病和視網(wǎng)膜病，是嚴(yán)重危害多種海水魚和部分淡水魚的一種病毒病，尤其對仔魚和幼魚危害很大，是魚苗培育期間的重要疾病，是我國目前石斑魚“標(biāo)粗”階段重要的疾病，池塘養(yǎng)殖海鱸放苗后也經(jīng)常見到魚苗“黑身”上浮死亡現(xiàn)象。
       2、本病例發(fā)病魚苗經(jīng)RT-PCR方法檢出病毒性神經(jīng)壞死病毒，病理切片觀察中樞神經(jīng)和視網(wǎng)膜組織出現(xiàn)空泡壞死病變，發(fā)病魚也具有“黑身”、游水、打轉(zhuǎn)等感染病毒性神經(jīng)壞死病的典型癥狀 ，初步診斷本病例海鱸魚苗“黑身”是病毒性神經(jīng)壞死病毒引起的。（利洋公司研究所一室 張東霞 戚瑞榮 王娟 張文文提供 2017.03.04）

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