譯/胡路怡
　

 

　
　　執(zhí)行摘要
　　
　　由NACA (亞太水產(chǎn)養(yǎng)殖中心)主辦的，針對(duì)新興的對(duì)蝦早期死亡綜合癥（EMS）/急性肝胰腺壞死綜合癥（AHPNS） 突發(fā)事件報(bào)告會(huì)議，于2012年8月9日至10日在泰國(guó)首都曼谷召開。此次咨詢會(huì)議召集了全球87位參與者，包括17位國(guó)際蝦病專家（來自澳大利亞，文萊，加拿大，中國(guó)，西班牙，泰國(guó)，英國(guó)，美國(guó)和越南）、40名政府官員（澳大利亞，孟加拉國(guó)，文萊，柬埔寨，中國(guó)，印尼，印度，緬甸，馬來西亞，尼泊爾，巴基斯坦，菲律賓，泰國(guó)，斯里蘭卡，新加坡和越南）和10位私企代表（來自奧特奇公司，拜耳公司，卡吉爾，CP，輝瑞公司，英偉，諾偉司，Pharmaq），15為國(guó)際組織官員（OIE, FAO, SEAFDEC, MPEDA, WFC,NACA）和7名泰國(guó)和越南的研究生。其中19位專家的演講分析了疾病的爆發(fā)、發(fā)展、病理、診斷，并對(duì)該問題的應(yīng)急方法做了交流分享。
　　
　　咨詢會(huì)議的目的
　　
　　1） 匯集全球知名專家、官員和生產(chǎn)家參與了解和討論正在東南亞發(fā)生的對(duì)蝦養(yǎng)殖疾病問題；
　　
　　2） 整合多國(guó)核心研究資源、交換信息、交流意見，更好的理解肝胰腺壞死綜合癥并探討應(yīng)對(duì)方法；
　　
　　3） 記錄目前的疾病狀況和各國(guó)的研究進(jìn)展，吸取各國(guó)各地區(qū)在應(yīng)對(duì)疾病問題上的經(jīng)驗(yàn)教訓(xùn)；
　　
　　4） 在處理東南亞未來水產(chǎn)緊急疾病問題上達(dá)成共識(shí)。

 

　　
　　什么是 早期死亡綜合癥（EMS）/急性肝胰腺壞死綜合癥（AHPNS）？
　　
　　Early Mortality Syndrome早期死亡綜合癥（EMS）最初的描述是在養(yǎng)成期投苗30天內(nèi)出現(xiàn)不尋常的高死亡率癥狀。該定義較為廣義，除了失敗的管理造成高死亡率外，一些病原例如：WSSV（白斑病毒）、YHV（黃頭病毒）和弧菌等也與EMS有關(guān)。因此，針對(duì)近期在亞洲爆發(fā)的對(duì)蝦養(yǎng)殖新疾病，用EMS來定義可能導(dǎo)致概念混淆。
　　
　　自2009年來，不明對(duì)蝦早期死亡疾病席卷亞洲，造成了在投苗以后30天內(nèi)大規(guī)模死亡的慘劇。已經(jīng)證實(shí)被感染的種類包括南美白對(duì)蝦和斑節(jié)對(duì)蝦，病蝦表現(xiàn)出肝胰腺蒼白和萎縮，甲殼質(zhì)地松軟，生長(zhǎng)緩慢，有時(shí)打轉(zhuǎn)游泳，垂死的對(duì)蝦沉入池底后死亡。組織學(xué)檢驗(yàn)后發(fā)現(xiàn)了對(duì)蝦呈現(xiàn)肝胰腺壞死，因此給予了這種疾病更為確切的定義，叫“Acute Hepatopancreas Necrosis Syndrome急性肝胰腺壞死綜合癥（AHPNS）”。

 

 

 

　　
　　急性肝胰腺壞死綜合癥（AHPNS）的案例分析（參考Don Ligntner 教授的演講）
　　
　　這次疾病咨詢會(huì)議，以未發(fā)現(xiàn)急性肝胰腺壞死綜合癥的致病因素（傳染病原或毒素）而告終。美國(guó)亞歷山大大學(xué)的著名對(duì)蝦疾病專家Don Ligntner教授將急性肝胰腺壞死定義為原發(fā)性疾病。所謂原發(fā)性疾病，可以理解為不明原因的疾病。此外，急性肝胰腺壞死的病理還包括 1）肝胰腺B、F、R和E細(xì)胞功能障礙，肝胰腺?gòu)闹胁肯蛩闹軌乃溃?2）肝胰腺細(xì)胞核變大，細(xì)胞脫落后進(jìn)入肝胰腺小管腔； 3）最后，血細(xì)胞發(fā)炎并伴隨著弧菌的感染。 在池塘養(yǎng)殖過程中，大家通常使用肉眼觀察來鑒定。對(duì)此，Ligntner教授也給出了以肉眼觀察來診斷疾病的方法：1）病變的肝胰腺結(jié)締組織色素缺失導(dǎo)致白化；2）肝胰腺顯著萎縮；3）對(duì)蝦甲殼質(zhì)地松軟，有時(shí)出現(xiàn)空腸現(xiàn)象；4）有時(shí)可以在肝胰腺中發(fā)現(xiàn)黑斑或黑條紋；5）用拇指和食指很難碾碎肝胰腺；6）嚴(yán)重的情況下，對(duì)蝦可在投苗10天左右開始死亡；7）垂死狀態(tài)的對(duì)蝦可能沉入池底。
　　
　　AHPNS疾病歷史和傳播區(qū)域 （參考 Disease Adversary）
　　
　　大約在2009年，AHPNS就開始在中國(guó)南部養(yǎng)殖區(qū)域擴(kuò)散并造成很大的損失。2010年，該疾病爆發(fā)范圍在中國(guó)擴(kuò)大，越南也開始報(bào)道了這種問題。2011年，疾病擴(kuò)散到馬來西亞；2012年初，在泰國(guó)發(fā)現(xiàn)了AHPNS。
　　
　　中國(guó)  早期死亡綜合癥最早于2009年在海南發(fā)現(xiàn)，常常被誤認(rèn)為“偷死”，當(dāng)時(shí)，很多養(yǎng)殖戶未引起重視。直至2011年，中國(guó)大陸地區(qū)的疾病問題才愈發(fā)突出。調(diào)查報(bào)告顯示，5齡以上的池塘和鹽度高于20ppt的近海區(qū)的病害情況尤為嚴(yán)重（Panakorn, S., 2012）。2011年上半年，海南、福建、廣東和廣西部分地區(qū)的死亡損失高達(dá)80%。
　　
　　馬來西亞 馬來西亞的南美白對(duì)蝦早期死亡綜合癥在2010年中期曾有報(bào)道，主要疾病發(fā)生在彭亨州和柔佛州，當(dāng)時(shí)還沒有對(duì)該疾病命名。2010年，馬來西亞約有11萬噸的南美白對(duì)蝦和斑節(jié)對(duì)蝦產(chǎn)量，但2011年統(tǒng)計(jì)結(jié)果顯示，總產(chǎn)量下降至4.5萬噸。2012年1月至5月，總產(chǎn)量?jī)H有2.5萬噸（數(shù)據(jù)來源：Malaysia Shrimp Industry Association）。早期死亡綜合癥使馬來西亞的南美白對(duì)蝦產(chǎn)量由2010年的8.7萬噸減產(chǎn)至6.7萬噸（數(shù)據(jù)來源： Annual Fisheries statistics）。而2012年上半年的2.5萬噸產(chǎn)量更是出乎大家的意料！馬來西亞的研究人員曾懷疑AHPNS與水質(zhì)污染和麻痹性貝類毒素有關(guān)，但這個(gè)假設(shè)需要更多的實(shí)驗(yàn)和調(diào)查予以佐證。
　　
　　越南 2010年，越南的湄公河三角洲地區(qū)發(fā)現(xiàn)了該疾病，直到2011年3月，早期死亡綜合癥被確立并相繼報(bào)道時(shí)，疾病問題已經(jīng)泛濫（Mooney, 2012）。越南的田剛，堅(jiān)江，檳知，朔莊，薄寮和金甌等省份的總計(jì)9.8萬公頃養(yǎng)殖面積受到該疾病的影響。2011年6月，斑節(jié)對(duì)蝦養(yǎng)殖業(yè)遭受空前的損失，其中茶榮省6200公頃養(yǎng)殖面積遭受毀滅性打擊，死亡的對(duì)蝦總數(shù)約為3.3億尾，直接經(jīng)濟(jì)損失120億越盾（合計(jì)約380萬人民幣）；朔莊省2萬公頃養(yǎng)殖面積受災(zāi)，經(jīng)濟(jì)損失1.5萬億越盾（約4.7億人民幣）（Mooney, 2012）。2012年1月至3月，AHPNS依然影響著湄公河三角洲和中南部沿海地區(qū)的對(duì)蝦養(yǎng)殖，在越南團(tuán)隊(duì)的疾病報(bào)告中估計(jì)，2012年全年受AHPNS嚴(yán)重影響的面積將在3.9萬公頃左右。
　　
　　泰國(guó) 至今為止，泰國(guó)大約0.7%的養(yǎng)殖池塘受到EMS的影響，主要分布在東部沿海地區(qū)（羅勇，尖竹汶，達(dá)叻府，北柳府�。�。雖然影響面積不大，但泰國(guó)政府、研究人員和對(duì)蝦養(yǎng)殖協(xié)會(huì)正在努力開展合作，以減輕疾病帶來的困擾。
　　
　　尋找致病原因 （參考Tim Flegel教授的演講）
　　
　　從AHPNS在亞洲，尤其是東南亞的擴(kuò)散情況上看，導(dǎo)致AHPNS蔓延的很可能是一種病原生物。但是目前為止，從越南和中國(guó)收集的對(duì)蝦樣本的組織慮液在人工感染試驗(yàn)中無法證實(shí)該疾病是由病毒引起的。AHPNS的組織病理學(xué)顯示該疾病癥狀很可能是中毒，但是在實(shí)驗(yàn)室條件下投喂越南提供的樣本飼料和測(cè)試菊酯（甲殼動(dòng)物殺蟲劑）的實(shí)驗(yàn)得出的結(jié)論依然無法證實(shí)之前的假設(shè)。PCR測(cè)試結(jié)果顯示，AHPNS與WSSV（白斑綜合癥病毒）、THV（黃頭病毒）、IMNV（傳染性肌肉壞死病毒）和TSV（桃拉綜合癥病毒）無關(guān)。
　　
　　盡管導(dǎo)致AHPNS的原因沒有得到確定，但針對(duì)疾病的病原和毒素研究不可中斷。研究調(diào)查需要專注于解決這方面的知識(shí)空白，探索調(diào)查所有可能的原因。
　　
　　探索的途徑包括：
　　
　　1. 生物性和非生物性的毒素：
　　
　　1） 從水質(zhì)、土壤和底質(zhì)中探索；
　　
　　2） 從飼料和飼料成分，微生態(tài)制劑成分中探索；
　　
　　3） 從養(yǎng)殖中使用的新老藥品中探索；
　　
　　2. 新型細(xì)菌研究：
　　
　　1） 應(yīng)用shotgun sequencing（鳥槍法測(cè)序）細(xì)菌的rRNA；
　　
　　2） 噬菌體細(xì)菌的相關(guān)研究入手；
　　
　　3. 新未知病毒探索：
　　
　　1） 同時(shí)測(cè)試組織過濾和未過濾提取物來確定是否存在病毒的可篩選性；
　　
　　2） 通過TEM方法檢測(cè)病蝦組織中的病毒粒；
　　
　　3） 鳥槍測(cè)序法檢測(cè)“病毒提取物”。
　　
　　Ligntner 教授于今年的7月底和8月初調(diào)查了越南幾個(gè)地區(qū)的對(duì)蝦養(yǎng)殖場(chǎng)�！皫缀跛�有的養(yǎng)殖場(chǎng)都出現(xiàn)了AHPNS問題，但是沒有一個(gè)有效的緩解措施，一個(gè)看似有效的應(yīng)激措施在另一個(gè)地方嘗試后不能得到理想中的效果”，教授表示，他和他的研究團(tuán)隊(duì)將在今年的九月或者十月重新準(zhǔn)備一份演講報(bào)告，這份報(bào)告將揭示AHPNS的原因及影響；提供面對(duì)該疾病時(shí)，在種苗場(chǎng)和養(yǎng)殖場(chǎng)兩方面的有效處理措施，以幫助養(yǎng)殖戶避免和降低疾病損失。（摘抄自《Global Aquaculture Alliance》）
　　
　　國(guó)外知名專家的技術(shù)演講和各國(guó)代表的演講
　　
　　1） Characterization, Distribution, Impacts and Case Definition 《急性肝胰腺壞死綜合癥的特征、分布、影響以及案例分析》   演講者：Don Lightner 教授
　　
　　2）Research Progress on Bacterial and Viral Causes of AHPNS 《急性肝胰腺壞死綜合癥的細(xì)菌和病毒研究進(jìn)展》   演講者：Tim Flegel 教授
　　
　　3） Disease Emergence –Why and How  《疾病的發(fā)生，為什么？怎么樣？》  演講者 Peter Walker 教授
　　
　　4） Novel Methods for “Hunting for Ghost Viruses” 《尋找“幽靈病毒”的新方法》  演講者： Jeff Cowley 博士
　　
　　5） Epidemiology and Risk Factors-What We Know? 《流行病學(xué)和危險(xiǎn)因素，我們所知道的是什么？》  演講者： Flavio Corsin 博士
　　
　　6） Is EMS a Management Problem？ 《早期死亡癥狀是養(yǎng)殖管理問題嗎？》  演講者：Matt Briggs 博士
　　
　　7） One Month Mortality Syndrome-Revisiting an old story  《一個(gè)月死亡癥狀-重溫一個(gè)老故事》  演講者： Celia Pitogo 博士
　　
　　8） Management of EMS-What Works and What Does Not?  《早期死亡綜合癥的管理-什么有效，什么無效?》  演講者： Chalor Limsuwan 教授
　　
　　9） Disease Preparedness-Theory and Practice. What Have We Learnt? 《疾病防備的理論和實(shí)踐，我們吸取了什么教訓(xùn)？》   演講者：Ingo Ernst 博士
　　
　　10） 中國(guó)、越南、泰國(guó)和馬來西亞 代表團(tuán)隊(duì)的演說
　　
　　所有演講的英文原版課件和聽力材料均可以在NACA網(wǎng)站上免費(fèi)下載。
　　
　　諸位專家演講的個(gè)人淺析
　　
　　針對(duì)在亞洲的突發(fā)對(duì)蝦疾病，全球知名專家匯聚于曼谷，從不同的角度剖析了AHPNS。雖然最終的原因沒有得到確立，但在會(huì)議上眾多專家達(dá)成了諸多共識(shí)，同時(shí)國(guó)際最新的水產(chǎn)疾病分子檢測(cè)技術(shù)也在會(huì)議上亮相。
　　
　　1） 早在2012年初，Ligntner教授就在GAA雜志上發(fā)表了早期綜合癥病理研究報(bào)告。此次會(huì)議上，Ligntner教授的演講內(nèi)容與之前發(fā)表的病理報(bào)告大體相同。Ligntner教授描述了組織病理特征，首先確立了弧菌繼發(fā)感染的觀點(diǎn)，即弧菌感染是發(fā)生在對(duì)蝦肝胰腺出現(xiàn)病變壞死之后。這個(gè)觀點(diǎn)得到了專家的廣泛認(rèn)同。雖然病理學(xué)顯示AHPNS很大程度上是一種生理中毒，但是實(shí)驗(yàn)測(cè)試了由越南提供的樣品飼料和一種甲殼動(dòng)物殺蟲劑（菊酯），結(jié)果顯示樣品飼料和菊酯均不是造成AHPNS的罪魁禍?zhǔn)住?BR>　　
　　2） Tim Flegel 教授針對(duì)AHPNS與細(xì)菌或病毒有關(guān)的問題做了詳細(xì)解釋。通過PCR測(cè)試，已經(jīng)排除了WSSV、YHV、IMNV和TSV造成AHPNS的可能性。在報(bào)告中，F(xiàn)legel 教授對(duì)EMS和AHPNS這兩個(gè)概念之間的差異進(jìn)行了解釋，并得到廣泛認(rèn)同。Flegel 教授指出了對(duì)蝦樣品收集和檢測(cè)時(shí)常出現(xiàn)的誤區(qū)并予以糾正，同時(shí)介紹了shotgun sequencing（鳥槍法測(cè)序）在對(duì)蝦疾病檢測(cè)上的應(yīng)用。
　　
　　3） 對(duì)于新疾病的發(fā)生和擴(kuò)散，生態(tài)學(xué)家Peter Walker教授認(rèn)為主要原因是某些傳染因素?cái)_亂了生態(tài)系統(tǒng)。Walker教授以在中國(guó)發(fā)生的SARS和基孔肯雅熱癥為例子做了精彩的開場(chǎng)白，他認(rèn)為在正常條件下，致病的病原是存在的但不致�。簧鷳B(tài)系統(tǒng)平衡被打亂了以后這些疾病才會(huì)感染健康的生物。對(duì)蝦疾病的爆發(fā)，是因?yàn)閷?duì)蝦養(yǎng)殖在高密度非自然的水環(huán)境中，同時(shí)對(duì)蝦常常受到來自外界的應(yīng)激，鮮活生物交易運(yùn)輸則輔助了疾病的擴(kuò)散。
　　
　　4） 泰國(guó)Chalor Limsuwan 教授在他的演講中強(qiáng)調(diào)了微生態(tài)制劑和AHPNS的關(guān)系，調(diào)查中指出，馬來西亞和泰國(guó)發(fā)現(xiàn)EMS的池塘，100%為前期水質(zhì)處理使用了微生態(tài)制劑；而在養(yǎng)殖全過程未使用微生態(tài)制劑的生物絮養(yǎng)殖模式池塘，沒有發(fā)現(xiàn)EMS。這些微生物（乳酸菌、酵母菌）產(chǎn)生的酸性物質(zhì)導(dǎo)致對(duì)蝦脫殼異常，間接導(dǎo)致軟殼和肌肉白濁。為了預(yù)防EMS，Chalor教授推薦養(yǎng)殖戶購(gòu)買PL10以上的種苗（PL10指post larvae期第10天），同時(shí)減少養(yǎng)殖前期使用微生態(tài)制劑調(diào)水，總堿度保持在100 mg/L以上，溶解氧保持在4 mg/L以上。
　　
　　5） 越南是AHPNS的重災(zāi)區(qū)之一，有人曾懷疑菊酯是造成AHPNS的兇手。菊酯的作用是消除養(yǎng)殖前期的白斑載體，在越南廣泛使用。但有反例證明，一些使用了菊酯的池塘沒有出現(xiàn)AHPNS，另外一些沒有使用菊酯的池塘AHPNS問題嚴(yán)重； Ligntner教授則通過實(shí)驗(yàn)證實(shí)了菊酯與AHPNS無關(guān)。此外，藻毒素也曾被列入懷疑名單，但是沒有證據(jù)證實(shí)藻毒素與AHPNS有直接關(guān)系。