| 水產(chǎn)前沿網(wǎng)獨家報道，春回水暖，珠三角大量加州鱸出現(xiàn)肝、腎腫大死魚，是何病因，如何防控？ 文/ 活寶源魚病室胡飛、梁芝源、胡雄 大口黑鱸（Micropterus salmoides），又名加州鱸，隸屬鱸形目（Perciformes）太陽魚科（Centrachidae）黑鱸屬（Micropterus），原產(chǎn)于北美洲密西西比河水系[1]。1983年引入我國廣東省，因其生長迅速、養(yǎng)殖周期短、肉質鮮美等，備受消費者青睞，現(xiàn)已在我國廣東、江蘇、浙江、四川、福建等地區(qū)形成規(guī)�；B(yǎng)殖[2-3]。但近年來，隨著養(yǎng)殖密度不斷增大、水體環(huán)境惡化、種質退化等因素影響，大口黑鱸養(yǎng)殖過程中病害頻發(fā)，給養(yǎng)殖戶帶來了重大經(jīng)濟損失[4]。 2021年春、冬季節(jié)，珠三角地區(qū)多個養(yǎng)殖場的大口黑鱸出現(xiàn)以腹部腫大、內臟有白點為主要癥狀的疾病，且該病治療難度較大。為明確其病因，筆者對多份病樣進行全面檢測，均從內臟分離到大量細菌，經(jīng)16S rRNA基因測序鑒定為遲鈍愛德華氏菌（Edwardsiella tarda）。 一、病情概況 2021年2月下旬以來，我們陸續(xù)接到多個養(yǎng)殖戶/養(yǎng)殖場反饋其加州鱸出現(xiàn)不明病因死魚現(xiàn)象，每天數(shù)十尾死魚，天氣轉涼病情稍有好轉，但天氣回暖時病情又迅速惡化，使用殺蟲、消毒、拌喂抗生素等多種方案均未能有效控制病情，病情持續(xù)往往長達半個多月。 二、主要癥狀 外觀上，部分病魚腹部膨大，部分病魚體表有個別點狀或斑塊狀淺表性潰瘍灶(P01)，也有部分病魚體表完好，無任何異狀(P02)；大部分病魚鰓絲紅潤(P03)，個別病魚局部爛鰓(P04)；解剖，其肝臟、后腎等器官均有不同程度的腫大(P05)，且肝臟、脾臟、腎臟等表面有大量直徑約0.5-1.0mm的細小白點(P06)，部分病魚有腹水(P07)。 三、實驗室檢測 我們從多個類似病情的池塘采集病魚送至活寶源魚病室進行全面檢測： �、偎|檢測：使用魚順牌便攜式水質快速檢測試劑盒檢測多個發(fā)病池塘水體的酸堿度(pH)、氨氮、亞硝酸鹽等常規(guī)指標，pH均介于7.2-7.8，氨氮0.6-1.5mg/L，亞硝酸鹽0.15-0.3，均屬正常水平。 �、诩纳x檢測：依次取適量病魚鰓絲、體表粘液、血液等制成水浸片，光學顯微鏡下鏡檢(4*4，4*10，4*40)，僅部分病魚鰓部有少量車輪蟲或斜管蟲，大部分病魚鰓絲無寄生蟲或其它明顯異常(P08)，初步排除寄生蟲病。 �、壑虏【鷻z測：無菌操作，取病魚的肝臟、脾臟、腎臟等接種于普通營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基，28℃恒溫培養(yǎng)22h，均出現(xiàn)大量淺黃色、圓形、濕潤菌落(P09)，這些菌落的形態(tài)高度一致。取典型菌落進行革蘭氏染色，結果呈現(xiàn)紅色，菌體短桿狀，大小在(0.5-1.0)×(1.0-3.0)μm(P11)。結合我們的檢測經(jīng)驗，初步判斷為高疑致病菌。 四、細菌鑒定與藥敏實驗 將上述高疑致病菌分離、純化后，選取5株典型菌株，編號為2102221、2102225、2102256、2102271、2102272，進行16S rRNA測序鑒定、藥敏實驗等。 提取上述菌株的DNA，使用16S rRNA通用引物進行體外擴增，并送至上海生工生物工程有限公司測序，在NCBI上進行Blastn比對分析，5株菌株的擴增產(chǎn)物與遲鈍愛德華氏菌的相似度均高達99%。 配制0.5麥氏單位的新鮮菌液，用無菌棉簽均勻涂布于普通營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基，進行紙片法藥敏試驗(藥敏片均購自杭州微生物有限公司)。結果表明，5株不同菌株均對常見漁用抗生素的耐藥性差異很大：菌株2102252對恩諾沙星、氟苯尼考、鹽酸多西環(huán)素、硫酸新霉素、復方新諾明等5種抗生素均較為敏感；而菌株2102271、2102221僅對恩諾沙星、硫酸新霉素一般敏感，對鹽酸多西環(huán)素、復方新諾明高度耐藥；菌株2102256、2102272對氟苯尼考高度敏感，但菌株2102221卻對氟苯尼考高度耐藥。 五、結果分析 結合實驗室檢測和相關資料，初步判斷本病由遲鈍愛德華氏菌感染引起。 遲鈍愛德華氏菌（Edwardsiella tarda）隸屬腸桿菌科、愛德華氏菌屬，是一種革蘭氏陰性菌，其生長溫度范圍為15-42℃，最適生長溫度為37℃。該菌在水產(chǎn)養(yǎng)殖中危害較大，可侵染日本鰻鱺、大菱鲆、黃顙魚、大口黑鱸等，引起發(fā)病死魚。 根據(jù)我們的調研，在珠三角地區(qū)，該菌幾乎全年均可引起大口黑鱸發(fā)病死魚，其中，以秋末冬初(11-12月)和冬末春初(2-4月)最為流行，一齡魚、二齡魚均可發(fā)病。不同于已有文獻的報道[5]，該病的主要臨床癥狀為：病魚肝臟、脾臟表面有大量細小白點，且后腎有明顯的充血腫大現(xiàn)象。區(qū)別于諾卡氏菌病，本病病魚肝臟、脾臟等處的白點僅1mm左右，大小十分均勻，觸感較軟滑，且僅限于肝臟、脾臟等內臟器官，不會出現(xiàn)在肌肉、鰓絲等處。 從藥敏結果看，這5株菌株對常見漁用抗生素的耐藥性差異很大，僅部分菌株對氟苯尼考、鹽酸多西環(huán)素、恩諾沙星等高度敏感，但不同菌株對這些抗生素的敏感性差異較大，不存在共同高度敏感的抗生素。這也不難理解，養(yǎng)殖戶在治療本病的過程中，根據(jù)經(jīng)驗用藥效果往往不明顯。盡管本病的日死亡率較低，但由于病程很長，往往長達2-3個星期，因而，總死亡量也較大，加之頻繁用藥，本病帶來的損失也較大。 六、防控建議 本病主要在秋末冬初和冬末春初流行，尤其是冬末春初氣溫回升階段發(fā)病率較高。這是因為：一方面，經(jīng)過長期的投喂和劇烈的天氣變化，加州鱸體質普遍偏差，對病菌的抵抗力較弱；另一方面，冬季池塘水溫低，糞便等有機物分解慢，積蓄于塘底，成為病菌的溫床，在開春氣溫回升時，微生物迅速大量繁殖，水質惡化，病菌增多，很易發(fā)病。為預防本病，在開春投喂時，應加強護肝，如拌喂膽汁酸、多維等；也應加強使用乳酸菌、芽孢桿菌等有益菌，調節(jié)水質，擠壓病菌的生態(tài)位。 如已發(fā)病，可先進行水體消毒，防止病情蔓延惡化，并第一時間采樣送至專業(yè)的魚病診斷機構進行細菌分離培養(yǎng)與藥敏實驗，根據(jù)藥敏結果選用敏感抗生素拌料投喂，切莫盲目用藥。 值得指出，我國常見的漁用抗生素休藥期在375~750℃·d之間，亦即一旦選用抗生素內服，在水溫18℃時，至少需要停藥21天才能上市（視抗生素種類和實際水溫而定），因此，如果病魚已達上市規(guī)格，則應盡量避免使用抗生素拌料投喂，而建議選用一些殺菌力較強的消毒劑進行水體消毒，以控制病情。 |
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