不同濃度單過硫酸氫鉀復(fù)合鹽制劑對(duì)養(yǎng)殖池水中理化因子影響與殺菌效果相關(guān)性試驗(yàn)觀察

　　文/圖華中農(nóng)業(yè)大學(xué)陳昌福、武漢科研時(shí)代生物技術(shù)有限公司周鑫軍

　　摘要：采用由不同生產(chǎn)企業(yè)制備的10種單過硫酸氫鉀復(fù)合鹽片劑、顆粒劑和粉劑，按照不同濃度投放在養(yǎng)殖池水中以后，檢測養(yǎng)殖池水中溶氧量、pH和氧化還原電位等幾種理化因子和對(duì)可培養(yǎng)細(xì)菌殺滅狀況。結(jié)果證明供試單過硫酸氫鉀復(fù)合鹽制劑，投放到養(yǎng)殖水體中以后，其溶氧量、pH和氧化還原電位等幾種理化因子變化趨勢不盡相同，而且對(duì)養(yǎng)殖池水中可培養(yǎng)細(xì)菌的殺滅作用也不盡一致。按照各種產(chǎn)品的說明書中規(guī)定的劑量不能顯示出對(duì)養(yǎng)殖水體中氧化還原電位的明顯改變和增加溶解氧含量以及可培養(yǎng)細(xì)菌的殺菌作用。試驗(yàn)結(jié)果說明，正在我國水產(chǎn)養(yǎng)殖用物質(zhì)市場上流通的的單過硫酸氫鉀復(fù)合鹽制劑，存在嚴(yán)重的質(zhì)量參差不齊問題。

　　關(guān)鍵詞：單過硫酸氫鉀復(fù)合鹽；養(yǎng)殖池水；理化性狀；增氧；氧化還原電位；殺菌效果

　　單過硫酸氫鉀復(fù)合鹽制劑是被不少水產(chǎn)相關(guān)人員賦予“改底、調(diào)水”等功能的一種合成復(fù)合鹽類物質(zhì)，也是我國目前在水產(chǎn)養(yǎng)殖中使用量比較大的一類化學(xué)物質(zhì)。單過硫酸氫鉀復(fù)合鹽制劑是一種無機(jī)過氧化物，也稱為過一硫酸氫鉀，它與硫酸氫鉀、硫酸鉀結(jié)合成三合鹽的形式存在。因此，將其稱之為單過硫酸氫鉀復(fù)合鹽制劑。

　　本試驗(yàn)觀察了將定量的單過硫酸氫鉀復(fù)合鹽制劑投放在盛有養(yǎng)殖池水的容器中，通過檢測供試養(yǎng)殖池水中溶氧量、pH、氧化還原電位等理化因子的變化狀態(tài)，對(duì)養(yǎng)殖池水中可培養(yǎng)細(xì)菌數(shù)量以及水產(chǎn)養(yǎng)殖動(dòng)物常見致病菌殺滅狀況等指標(biāo)，初步評(píng)價(jià)了將單過硫酸氫鉀復(fù)合鹽制劑投放在養(yǎng)殖水體中的“調(diào)水”功能�，F(xiàn)將試驗(yàn)結(jié)果報(bào)告如下。

　　1.材料和方法

　　在本次試驗(yàn)中，選用由不同生產(chǎn)企業(yè)制備的10種單過硫酸氫鉀復(fù)合鹽制劑片劑、顆粒劑和粉劑。全部供試制劑是從武漢市新洲區(qū)汪集鎮(zhèn)漁藥銷售點(diǎn)采購到的。包括由湖北省某公司生產(chǎn)的“Ⅰ號(hào)片劑”（單顆粒均重：1.38g，未標(biāo)注主成分含量）、由湖北省某公司生產(chǎn)的“Ⅱ號(hào)片劑”（單顆粒均重：1.28g，含量：20.0%）、由重慶市某公司生產(chǎn)的“Ⅲ號(hào)片劑”（單顆粒均重：0.95g，未標(biāo)注主成分含量）、由江蘇省某公司生產(chǎn)“Ⅳ號(hào)片劑”（單顆粒均重：0.86g，未標(biāo)注主成分含量）、由廣東省某公司生產(chǎn)的“Ⅴ號(hào)片劑”（單顆粒均重：0.68g，含量：20.0%）、湖北省某公司生產(chǎn)的“Ⅵ號(hào)顆粒劑”（未標(biāo)注主成分含量）、上海市某公司生產(chǎn)的“VII號(hào)粉劑”（含量：50.0%）。北京市某公司生產(chǎn)的“Ⅷ號(hào)片劑”（單顆粒均重：1.05g，未標(biāo)注主成分含量）、內(nèi)蒙古某公司生產(chǎn)的“Ⅸ號(hào)片劑”（單顆粒均重：0.86g，未標(biāo)注主成分含量）和湖南省某公司生產(chǎn)的“Ⅹ號(hào)片劑”（單顆粒均重：1.25g，未標(biāo)注主成分含量）。

　　用于本試驗(yàn)的養(yǎng)殖池水，均為取自武漢市新洲區(qū)汪集鎮(zhèn)魚苗孵化場的養(yǎng)殖池同一取樣點(diǎn)相同深度的池水。將供試容器在養(yǎng)殖池塘水體中清洗干凈后，供作本試驗(yàn)中的盛裝養(yǎng)殖池水的容器。

　　在容量為500.0mL的玻璃燒杯中，每個(gè)玻璃燒杯中盛裝養(yǎng)殖池水400.0mL，供做單過硫酸氫鉀復(fù)合鹽制劑對(duì)養(yǎng)殖池水中可培養(yǎng)細(xì)菌殺滅效果的試驗(yàn)（圖1）。在容量為250.0mL的

　　圖1，在玻璃燒杯（上圖）和三角瓶（下圖，滅菌）盛裝養(yǎng)殖池水的殺菌試驗(yàn)狀況

　　玻璃三角瓶中，每個(gè)三角瓶中盛裝100.0mL養(yǎng)殖池水，經(jīng)過高壓滅菌消毒后，供完成單過硫酸氫鉀復(fù)合鹽制劑在養(yǎng)殖池水中，對(duì)養(yǎng)殖魚類常見致病菌殺滅效果試驗(yàn)。全部試驗(yàn)在27~28℃的室溫條件下實(shí)施。

　　1.3養(yǎng)殖魚類常見致病菌培養(yǎng)及其菌液制備

　　將引起淡水魚類細(xì)菌性敗血癥的病原菌嗜水氣單胞菌（Aeromonas hydrophila），接種在腦心浸液瓊脂（BHIA，Difco）培養(yǎng)基中，置于28℃的恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h后，采用滅菌生理鹽水分別洗下菌落，配置成107cfu/mL菌液濃度，置于4℃冰箱中備用。

　　將盛有養(yǎng)殖池水的玻璃燒杯和玻璃三角瓶，放置于無菌條件下。首先向每個(gè)盛有100.0mL養(yǎng)殖池水并經(jīng)過高壓滅菌消毒后的三角瓶中，準(zhǔn)確加入菌液濃度為1.0×107cells/mL的A.hydrophila活菌液0.5mL，搖動(dòng)均勻后，繼續(xù)靜置15min后，備用。在未經(jīng)過高壓滅菌的盛有400.0mL養(yǎng)殖池水的玻璃燒杯中，不做添加致病菌的處理，備用。

　　向每一個(gè)玻璃燒杯和玻璃三角瓶中，分別加入定量的單過硫酸氫鉀復(fù)合鹽制劑，使玻璃燒杯和玻璃三角瓶中的單過硫酸氫鉀復(fù)合鹽制劑的濃度，分別達(dá)到5.00mg/L、25.00mg/L和50.00mg/。在向每個(gè)容器中添加完藥物后，用玻璃棒攪拌均勻，繼續(xù)在超凈工作臺(tái)內(nèi)靜置40.0min。另外，采取添加菌液而不加藥物和既不加菌液也不加藥物的玻璃三角瓶，分別作為有菌無藥和無菌無藥對(duì)照組。

　　1.5單過硫酸氫鉀復(fù)合鹽制劑對(duì)養(yǎng)殖池水中氧化還原電位影響的測定

　　在向每個(gè)盛有400.0mL養(yǎng)殖池水的玻璃燒杯中投放單過硫酸氫鉀復(fù)合鹽制劑的前后，在90min的時(shí)間內(nèi)連續(xù)4次檢測其養(yǎng)殖池水的溶氧量、pH和氧化還原電位等部分理化性狀的變化狀況。

　　在無菌條件下，從每個(gè)玻璃燒杯和玻璃三角瓶中盛有養(yǎng)殖池水中取50.0μL水樣，均勻涂布在盛有BHIA培養(yǎng)基的平皿中，將涂好的培養(yǎng)皿置于在28℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。從每個(gè)玻璃三角瓶中盛有經(jīng)過高壓滅菌養(yǎng)殖池水中取50.0μL水樣，涂布在盛有BHIA培養(yǎng)基的平皿中（圖2），將涂布菌液的平皿置于在28℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)48h后，根據(jù)培養(yǎng)皿中的菌落數(shù)量判斷藥物的殺菌效果，即判定單過硫酸氫鉀復(fù)合鹽制劑的最小殺菌濃度（minimum bactericidal concentration，MBC）。

　　圖2，從三角瓶中盛裝滅菌養(yǎng)殖池水中采樣進(jìn)行養(yǎng)殖魚類致病菌的培養(yǎng)與檢測

　　在投放不同濃度的各種單過硫酸氫鉀復(fù)合鹽制劑后，對(duì)養(yǎng)殖池水中溶氧量的檢測結(jié)果如表1所示。由表1所示內(nèi)容可以看出，在向各個(gè)燒杯中投放不同濃度的各種單過硫酸氫鉀復(fù)合鹽制劑后，養(yǎng)殖養(yǎng)殖池水中溶氧量均出現(xiàn)不同程度地上升。但是，與對(duì)照組相比，上升幅度不明顯，與投放各種單過硫酸氫鉀復(fù)合鹽制劑不同劑量的相關(guān)性也是不明顯的。

　　2.2單過硫酸氫鉀復(fù)合鹽制劑對(duì)養(yǎng)殖養(yǎng)殖池水中pH的影響

　　在投放不同濃度的各種單過硫酸氫鉀復(fù)合鹽制劑后，對(duì)養(yǎng)殖養(yǎng)殖池水中pH的檢測結(jié)果如表2所示。由表2所示內(nèi)容可以看出，在向各個(gè)燒杯中投放不同濃度的各種單過硫酸氫鉀復(fù)合鹽制劑后，養(yǎng)殖養(yǎng)殖池水中pH幾乎沒有出現(xiàn)變化。

　　2.3單過硫酸氫鉀復(fù)合鹽制劑對(duì)養(yǎng)殖養(yǎng)殖池水中氧化還原電位的影響

　　在投放不同濃度的各種單過硫酸氫鉀復(fù)合鹽制劑后，對(duì)養(yǎng)殖養(yǎng)殖池水中氧化還原電位的檢測結(jié)果如表3所示。由表3所示內(nèi)容可以看出，在向各個(gè)燒杯中投放不同濃度的各種單過硫酸氫鉀復(fù)合鹽制劑后，養(yǎng)殖養(yǎng)殖池水中氧化還原電位沒有出現(xiàn)有明顯的規(guī)律性的變化。

　　表3，不同種類與劑量單過硫酸氫鉀復(fù)合鹽制劑對(duì)養(yǎng)殖養(yǎng)殖池水中氧化還原電位的影響

　　2.4單過硫酸氫鉀復(fù)合鹽制劑對(duì)養(yǎng)殖養(yǎng)殖池水可培養(yǎng)細(xì)菌的殺滅效果

　　在投放不同濃度的各種單過硫酸氫鉀復(fù)合鹽制劑后，對(duì)養(yǎng)殖養(yǎng)殖池水可培養(yǎng)細(xì)菌的檢測結(jié)果如圖3所示。由圖3可以看出，在向各個(gè)燒杯中投放不同濃度的各種單過硫酸氫鉀復(fù)合鹽制劑后，大多數(shù)種類的制劑沒有顯示出殺菌效果，只是少數(shù)幾個(gè)種類的單過硫酸氫鉀復(fù)合鹽制劑在達(dá)到25.0mg/L的濃度時(shí)，顯示出對(duì)養(yǎng)殖池水中的可培養(yǎng)細(xì)菌和A.hydrophila有一定的殺菌效果。

　　從查閱相關(guān)文獻(xiàn)資料中的介紹內(nèi)容可知，單過硫酸氫鉀復(fù)合鹽制劑的確可能是特別適合在水產(chǎn)養(yǎng)殖中廣泛使用的水產(chǎn)養(yǎng)殖用物質(zhì)。據(jù)稱這種物質(zhì)溶于水體后可以釋放出活性氧[O]，并通過產(chǎn)品攜帶的高能活化劑經(jīng)由鏈?zhǔn)椒磻?yīng)而產(chǎn)生各種高能量、高活性的小分子的自由基、新生態(tài)原子氧、氧自由基、羥基自由基（·OH）、硫酸自由基（SO4−·）等多種活性成分。因此，單過硫酸氫鉀復(fù)合鹽制劑較長時(shí)期以來，被人們譽(yù)為“高效氧化消毒劑”，認(rèn)為這種產(chǎn)品是其具有廣泛殺滅微生物作用的，包括細(xì)菌、芽胞、病毒、真菌等給水水體及給水管網(wǎng)中耐氯性細(xì)菌的滅活等。

　　在本試驗(yàn)研究中，將從市場上采購的由不同生產(chǎn)企業(yè)生產(chǎn)的10種單過硫酸氫鉀復(fù)合鹽片劑、顆粒劑和粉劑，在養(yǎng)殖池水中按照不同濃度投放在養(yǎng)殖池水中以后，檢測養(yǎng)殖池水中幾種理化因子和對(duì)可培養(yǎng)細(xì)菌殺滅狀況，結(jié)果證明本次供試單過硫酸氫鉀復(fù)合鹽制劑，投放到養(yǎng)殖池水中以后，其理化因子變化趨勢不盡相同，而且對(duì)可培養(yǎng)細(xì)菌的殺滅作用也不盡一致。幾個(gè)顯示殺菌效果的供試制劑也需要用到很高的濃度，而按照這樣的劑量使用這種產(chǎn)品，其投入成本是水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)者難以承受的。因此，根據(jù)本試驗(yàn)獲得的結(jié)果，是否意味著隨機(jī)采購的這10種單過硫酸氫鉀復(fù)合鹽制劑的質(zhì)量存在差異的緣故？

　　在本試驗(yàn)研究結(jié)果中，出現(xiàn)2種單過硫酸氫鉀復(fù)合鹽制劑在達(dá)到25.0mg/L的濃度條件下，顯示出了一定的殺菌效果，即使這2種顯示出一定殺菌效果的單過硫酸氫鉀復(fù)合鹽制劑，也并未顯示出明顯增加養(yǎng)殖池水中溶氧量和改變其氧化還原電位的效果。在本試驗(yàn)中獲得的結(jié)果，與產(chǎn)品說明書中表明的作用與功效存在較大的差距。

　　如果按照能顯示殺菌效果的25.0mg/L的濃度計(jì)算在水產(chǎn)養(yǎng)殖池塘中的使用單過硫酸氫鉀復(fù)合鹽制劑的用量，需要達(dá)到16.7kg/667m3的用量，是水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)者難以接受的高昂經(jīng)濟(jì)成本，如此大量地使用這類化學(xué)制劑，對(duì)水產(chǎn)養(yǎng)殖水體會(huì)產(chǎn)生何種影響，也是令人擔(dān)心的問題。

　　因?yàn)槲覀冊谶M(jìn)行這個(gè)試驗(yàn)之前，尚未檢測供試過硫酸氫鉀復(fù)合鹽制劑的質(zhì)量。因此，尚難以判定試驗(yàn)中使用的10種單過硫酸氫鉀復(fù)合鹽制劑的真假，今后還有必要對(duì)這類產(chǎn)品的質(zhì)量做進(jìn)一步檢測。

　　本文作者聲明

　　各位讀者：我們完成這個(gè)試驗(yàn)并且決定將結(jié)果公布出來只是基于一個(gè)目的：為我國廣大的水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)者尋找到適宜的物質(zhì)和確定其科學(xué)、合理的用法和用量，也為我國水產(chǎn)養(yǎng)殖的健康、綠色、可持續(xù)發(fā)展做出一點(diǎn)努力。我們不是藥企經(jīng)營者也未接受任何藥企的委托。因此，不存在為了推出某種產(chǎn)品而打擊其他公司的同類產(chǎn)品的目的和主管意圖！

　　在此，我們熱忱地歡迎制售這類產(chǎn)品的企業(yè)，能安排相關(guān)人員帶著貴公司的優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品，光臨我們的實(shí)驗(yàn)室，讓我們按照上述文章中的試驗(yàn)方法一起完成相關(guān)試驗(yàn)，也給我們提供一次向有作為企業(yè)家學(xué)習(xí)的機(jī)會(huì)。