中國(guó)水產(chǎn)頻道報(bào)道, 水產(chǎn)品在我國(guó)動(dòng)物產(chǎn)品消費(fèi)中始終占有重要位置,消費(fèi)份額較大,全國(guó)人均水產(chǎn)品消費(fèi)約占豬牛羊肉消費(fèi)量的一半。目前國(guó)內(nèi)市場(chǎng)的水產(chǎn)品主要以鮮活為主,伴隨國(guó)民生活水平的提升,對(duì)水產(chǎn)品需求量也在逐年增加,也促使了水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)的快速發(fā)展,但同時(shí)也引起了不少的質(zhì)量安全問(wèn)題。養(yǎng)殖戶為了有效的預(yù)防魚(yú)類的疾病,增加產(chǎn)量,會(huì)偷偷的非法使用禁用藥物,加之操作不規(guī)范,會(huì)導(dǎo)致水產(chǎn)品質(zhì)量下降,如果人食用了藥物超標(biāo)的水產(chǎn)品,嚴(yán)重的會(huì)有生命危險(xiǎn)。目前水產(chǎn)質(zhì)量安全問(wèn)題已日益突出,引起了政府和人們的廣泛關(guān)注。因此,解決水產(chǎn)中禁用藥物的快速檢測(cè)問(wèn)題也是迫在眉睫。水產(chǎn)品的質(zhì)量安全是全國(guó)人民享有健康生活的重要保障,而水產(chǎn)品中違禁藥物的殘留是當(dāng)前危害最嚴(yán)重的因素之一,孔雀石綠是其中最具有代表性的一種。 2014年9月,深圳特區(qū)布吉海鮮市場(chǎng)開(kāi)展了一次名為“清水行動(dòng)”的水產(chǎn)品專項(xiàng)執(zhí)法監(jiān)督抽查。在這次行動(dòng)中,執(zhí)法部門(mén)共抽檢了43家水產(chǎn)品經(jīng)營(yíng)戶,共抽取樣品121份,其中淡水魚(yú)樣品90份。經(jīng)檢測(cè),發(fā)現(xiàn)7個(gè)水產(chǎn)品樣品檢測(cè)不合格(其中孔雀石綠超標(biāo)5個(gè),硝基呋喃代謝物超標(biāo)2個(gè));2016 年底,國(guó)內(nèi)媒體“熱搜”的北京超市“活魚(yú)下架事件”,社會(huì)普遍認(rèn)為與孔雀石綠等的濫用有關(guān);2019年4月,省農(nóng)業(yè)農(nóng)村廳委托山東省水產(chǎn)品質(zhì)量檢驗(yàn)中心對(duì)臨朐縣水產(chǎn)品進(jìn)行了質(zhì)量安全抽檢,被抽檢的6個(gè)鱘魚(yú)樣品檢驗(yàn)呈陽(yáng)性,檢驗(yàn)結(jié)果結(jié)果為孔雀石綠含量超標(biāo);同年6月,杭州市消保委對(duì)本志7家買菜類APP進(jìn)行消費(fèi)評(píng)測(cè),結(jié)果為杭州美團(tuán)、叮咚買菜的鱖魚(yú)、天津永輝超市草魚(yú)被檢出孔雀石綠超標(biāo)。由此可見(jiàn),孔雀石綠殘留問(wèn)題已成為一個(gè)日益突出的食品安全問(wèn)題。 什么是孔雀石綠? 孔雀石綠作為染色劑,用于皮革業(yè)、紡織業(yè)、制陶業(yè)、食品和生物的染色,是人工合成的三苯甲烷類化學(xué)物。同時(shí),孔雀石綠也可以用作殺菌劑,驅(qū)蟲(chóng)劑,用于預(yù)防與治療水生動(dòng)物細(xì)菌、真菌和寄生蟲(chóng)的感染,由于其成本低,效果顯著,所以被普遍用在水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)中。然而隨著研究的深入,孔雀石綠的高毒性,高殘留的性質(zhì)及潛在的致畸、致癌、致突變等毒副作用倍受大家的關(guān)注。鑒于其潛在的致癌性,美國(guó)、加拿大、日本、歐盟等許多國(guó)家將其 列為水產(chǎn)殖禁用藥物。歐盟法案2002/675/EC規(guī)定,動(dòng)物源性食品中MG和LMG殘留總量限制為2μg/kg;日本的肯定列表明確規(guī)定在進(jìn)口水產(chǎn)品中不得檢出MG殘留。我國(guó)于2002年5月將孔雀石綠 列入《食品動(dòng)物禁用的獸藥及其他化合物清單》中,于2005年制定了孔雀石綠的使用標(biāo)準(zhǔn),規(guī)定在水產(chǎn)品中,MG 和LMG的殘留總限量不得超1 μg/kg。 但違規(guī)使用孔雀石綠的事件時(shí)有發(fā)生,如歐盟、日本、中國(guó)香港等國(guó)家和地區(qū)曾從我國(guó)大陸進(jìn)口的鰻魚(yú)中檢出MG及LMG殘留,不僅影響生態(tài)環(huán)境,還成為影響我國(guó)食品質(zhì)量安全和國(guó)際市場(chǎng)競(jìng)爭(zhēng)力的重要因素。 檢測(cè)技術(shù)的應(yīng)用 孔雀石綠進(jìn)入動(dòng)物體內(nèi)后會(huì)快速代謝為無(wú)色孔雀石綠,無(wú)色孔雀石綠為脂溶性物質(zhì),相較孔雀石綠而言毒性更強(qiáng),基本無(wú)法代謝。國(guó)內(nèi)外均以孔雀石綠和其代謝物無(wú)色孔雀石綠的總量為測(cè)定指標(biāo),目前測(cè)定方法主要有儀器分析測(cè)定(高效液相、液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用等)、免疫學(xué)檢測(cè)技術(shù)(酶聯(lián)免疫檢測(cè)技術(shù)、膠體金檢測(cè)技術(shù)等)和微光探測(cè)與免疫學(xué)技術(shù)的結(jié)合(熒光定量檢測(cè)技術(shù))。從快速篩查市場(chǎng)而言,后兩種方法已逐漸成為檢測(cè)市場(chǎng)的主流。 1. 儀器分析法 主要是指利用氣相色譜法、氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法、液相色譜法、高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法或各類光譜儀等大型精密儀器來(lái)進(jìn)行藥物殘留的分析方法。此類方法是一種準(zhǔn)確性高、靈敏度高、特異性好、選擇性強(qiáng)的檢測(cè)方法,現(xiàn)普遍用于檢測(cè)獸藥和農(nóng)藥殘留,許多國(guó)家和地區(qū)已將高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法作為檢測(cè)孔雀石綠殘留的確證方法。但此方法需要昂貴的儀器和專業(yè)的技術(shù)人員操作,且無(wú)法實(shí)現(xiàn)大批量快速檢測(cè),相對(duì)成本較高,不具備現(xiàn)場(chǎng)快速篩查的優(yōu)勢(shì)。 2. 免疫學(xué)檢測(cè)技術(shù) 免疫學(xué)檢測(cè)技術(shù)是利用抗原抗體的特異性結(jié)合的原理,相對(duì)儀器分析法而言,具有的最大優(yōu)勢(shì)為操作便捷,利于市場(chǎng)的快速篩查。現(xiàn)階段,食品安全的快速檢測(cè)技術(shù)主要有酶聯(lián)免疫檢測(cè)技術(shù)和膠體金檢測(cè)技術(shù)。 2.1 酶聯(lián)免疫檢測(cè)技術(shù) 其原理是應(yīng)用抗原和抗體的特異結(jié)合與酶催化作用的有機(jī)結(jié)合,利用酶促反應(yīng)原理有較的放大了免疫檢測(cè)的效果,具有較高的靈敏度,同時(shí)還具備了定量檢測(cè)的特性。酶免檢測(cè)技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)是檢測(cè)靈敏度高、特異性好、高通量和高精密度的特點(diǎn),且無(wú)需大型儀器設(shè)備,可進(jìn)行大批量的樣品初篩檢測(cè)。雖然酶免較儀器法具有一定的優(yōu)勢(shì),但由于其檢測(cè)時(shí)需專業(yè)人員操作,檢測(cè)時(shí)間較長(zhǎng),同樣也無(wú)法滿足現(xiàn)場(chǎng)快速篩查的需求。 2.2 膠體金檢測(cè)技術(shù) 膠體金檢測(cè)技術(shù)是以納米金顆粒作為示蹤標(biāo)識(shí)物,應(yīng)用抗原和抗體具有特異性結(jié)合的原理所建立的新型免疫標(biāo)記技術(shù),是色譜層析技術(shù)和納米金技術(shù)的有機(jī)結(jié)合。膠體金檢測(cè)技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)就是操作簡(jiǎn)單、檢測(cè)時(shí)間短和無(wú)需專業(yè)技術(shù)人員操作。因?yàn)檫@些特性,使得膠體金技術(shù)廣泛應(yīng)用于大分子類蛋白、農(nóng)藥殘留、獸藥殘留、小分子類藥物和毒素類等的快速檢測(cè)中。雖然膠體金法具有一定的優(yōu)勢(shì),但由于其較差的靈敏度,無(wú)法滿足國(guó)家檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)的要求,加大了漏檢的風(fēng)險(xiǎn)。 3. 微光探測(cè)與免疫學(xué)技術(shù)的結(jié)合 隨著各類學(xué)科交叉的不斷深入,現(xiàn)代快速檢測(cè)技術(shù)越來(lái)越趨向于便攜、操作簡(jiǎn)單快捷、檢測(cè)結(jié)果即時(shí)準(zhǔn)確的方向發(fā)展,使得開(kāi)發(fā)出的相應(yīng)產(chǎn)品具有極大的市場(chǎng)潛力,而熒光定量檢測(cè)技術(shù)就是食品安全快速檢測(cè)市場(chǎng)中最具代表性的新型檢測(cè)方法。此方法是免疫學(xué)技術(shù)、色譜層析技術(shù)、生物探針技術(shù)和微光探測(cè)技術(shù)的有機(jī)結(jié)合,兼具儀器分析法、酶聯(lián)免疫檢測(cè)技術(shù)、膠體金檢測(cè)技術(shù)的優(yōu)點(diǎn),取長(zhǎng)補(bǔ)短,在保持儀器法高精確性的同時(shí)還保留了膠體金法檢測(cè)的快速、簡(jiǎn)便和酶免技術(shù)的高靈敏度、可定量的特點(diǎn)。 孔雀石綠檢測(cè)技術(shù)的發(fā)展 孔雀石綠的殘留主要體現(xiàn)在水產(chǎn)品中,特別是在高油酯的魚(yú)類中尤為明顯,所以針對(duì)孔雀石綠的檢測(cè)對(duì)象主要為可食用組織,我國(guó)根據(jù)此種情況也建立了孔雀石綠在可食用性組織中的國(guó)家檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn),但由于其需要昂貴的儀器和復(fù)雜的樣本處理過(guò)程,使得在現(xiàn)場(chǎng)快速篩查和基層執(zhí)法部門(mén)中無(wú)法大量推廣。在快速檢測(cè)產(chǎn)品中,孔雀石綠酶免試劑盒最早進(jìn)入快篩市場(chǎng),但由于其繁瑣的操作過(guò)程,很快被膠體金產(chǎn)品所取代?兹甘G膠體金產(chǎn)品雖然檢測(cè)速度快,只需30-45分鐘,但膠體金較差的靈敏度,也增加了漏檢的風(fēng)險(xiǎn);同時(shí),組織類的樣本前處理依然復(fù)雜、費(fèi)時(shí),存在著離心、吹干等步驟,不僅增加了人力成本,也使得在吹干大量溶劑時(shí),嚴(yán)重污染了環(huán)境。對(duì)于吹干的問(wèn)題,市場(chǎng)一直在尋求解決的方法,近年來(lái)市場(chǎng)上推出的SPE產(chǎn)品就是對(duì)吹干這一步驟的優(yōu)化處理。SPE方法的優(yōu)點(diǎn)是省略了吹干環(huán)節(jié),使得處理速度有了一定的提升,但同樣存在著一些不足:1、步驟和儀器未得到省略,離心及相應(yīng)的儀器仍需使用,吹干步驟換成了過(guò)SPE柱,同時(shí)也增加了固相萃取儀;2、增加了成本,SPE柱成本較高,約增加20-40%;3、浪費(fèi)溶劑,吸附和洗脫時(shí)均需大量試劑;4、洗脫效率不穩(wěn)定等。 針對(duì)目前快速檢測(cè)方法仍然存在的問(wèn)題,我司經(jīng)過(guò)了長(zhǎng)時(shí)間的技術(shù)攻關(guān),結(jié)合高分子納米材料和免疫層析卡的優(yōu)點(diǎn),開(kāi)發(fā)了全新的孔雀石綠殘留快速檢測(cè)卡,并結(jié)合先進(jìn)的專利數(shù)據(jù)采集技術(shù),國(guó)內(nèi)外首創(chuàng)地研制出了全新的孔雀石綠FST快速前處理方案(包含膠體金和熒光層析系列產(chǎn)品),較傳統(tǒng)的檢測(cè)產(chǎn)品相比,檢測(cè)效率提高兩倍以上,靈敏度更優(yōu),精密性更好,智能化更高。產(chǎn)品如下圖: FST快速前處理方案 FST的技術(shù)理念基于組織類樣本的快速、便捷的前處理方案,是我司專門(mén)為解決繁瑣的組織類樣本前處理而開(kāi)發(fā)的,是組織類樣本POCT技術(shù)的一大突破,為國(guó)內(nèi)外首創(chuàng)。其特點(diǎn)是省略了離心、吹干或上萃取柱步驟,實(shí)驗(yàn)全程只需一把移液器即可完成,極大縮短了樣本檢測(cè)時(shí)間。 目前,我司的FST系列產(chǎn)品包括兩大類:FST-膠體金和FST-熒光層析?兹甘GFST-膠體金產(chǎn)品在保持同類市場(chǎng)的高靈敏度的前提了,把組織類的樣本處理進(jìn)行了極簡(jiǎn)化處理,處理時(shí)間從常規(guī)的25-40分鐘縮短為 10分鐘以內(nèi),整個(gè)檢測(cè)過(guò)程無(wú)需任何輔助儀器,極大的節(jié)省了人力和物力成本,且此類產(chǎn)品順利通過(guò)了2018年的農(nóng)業(yè)部驗(yàn)證和2019年的廣東省快檢驗(yàn)證。 孔雀石綠FST-膠體金產(chǎn)品雖然在性能上有了很大提升,但其不能定量的不足也始終無(wú)法解決,針對(duì)這一難點(diǎn),我司專門(mén)開(kāi)發(fā)FST-熒光層析系列產(chǎn)品。孔雀石綠FST-熒光層析產(chǎn)品結(jié)合了高分子納米技術(shù)和微光探測(cè)技術(shù),是在FST-膠體金產(chǎn)品性能上的進(jìn)一步提升,具有靈敏度高(可達(dá)液相質(zhì)譜的靈敏度要求)、樣本處理快速(縮短為5分鐘以內(nèi))、抗干擾能力更強(qiáng)(大稀釋比例降低了樣本對(duì)產(chǎn)品的干擾)、半定量的檢測(cè)(檢測(cè)結(jié)果以數(shù)據(jù)顯示)、數(shù)據(jù)即時(shí)處理(數(shù)據(jù)即時(shí)存儲(chǔ)或打印)等優(yōu)勢(shì)。孔雀石綠FST-熒光層析產(chǎn)品順利通過(guò)了2018年農(nóng)業(yè)部驗(yàn)證,為全場(chǎng)時(shí)間最快,檢測(cè)靈敏度最高的快速檢測(cè)產(chǎn)品。為了更好的區(qū)分現(xiàn)有市場(chǎng)中主流檢測(cè)產(chǎn)品間的差異,下表針對(duì)參加2018年農(nóng)業(yè)部驗(yàn)證的相關(guān)技術(shù)產(chǎn)品做了簡(jiǎn)單的技術(shù)比較: 結(jié)論與展望 水產(chǎn)品是國(guó)民餐桌上的重要組成,國(guó)家政府也一直致力于解決食品的安全問(wèn)題,近年來(lái)更是針對(duì)水產(chǎn)品的藥物殘留加大了抽檢力度,而孔雀石綠一直是人民關(guān)注的重點(diǎn),但由于現(xiàn)有檢測(cè)技術(shù)的樣本前處理較繁瑣,使得抽檢率無(wú)法大幅提升。因此,隨著政府的進(jìn)一步加強(qiáng),快篩市場(chǎng)對(duì)現(xiàn)有檢測(cè)技術(shù)也必將提出更高的要求?焖、便捷、準(zhǔn)確、智能化等一直是快速檢測(cè)的重要需求,而我司的FST前處理技術(shù)恰巧是對(duì)這一需求的極大補(bǔ)充。隨著FST技術(shù)的進(jìn)一步發(fā)展,相信對(duì)監(jiān)管孔雀石綠的濫用具有重要意義。 |
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